Molecular subtyping of Salmonella spp. strains in provincial abattoirs with no hazard analysis critical control point from Buenos Aires, Argentina / Subtipificación molecular de Salmonella spp. en frigoríficos provinciales sin análisisde peligros y puntos críticos de control ubicados en Buenos Aires, Argentina

Abstract We subtyped 32 Salmonella enterica strains isolated from carcasses (n = 10), theenvironment (n = 14), head meat (n = 1) and viscera washing and chilling water (n = 7) in provin-cial abattoirs with no Hazard Analysis Critical Control Point (HACCP) system from Buenos Aires,Argentina, before and after implementing improvement actions. Pulsed-field gel electrophore-sis (PFGE) was carried out using the XbaI restriction enzyme. Strains belonged to six serovars,from which 10 restriction patterns were obtained (five unique patterns and five clusters). Wefound different clones of S. enterica serovars in the same abattoir by XbaI-PFGE. In addition topromoting good hygiene practices, the implementation of an HACCP plan is necessary to meetthe zero-tolerance criteria for Salmonella on beef.

Resumen Subtipificamos en total 32 cepas de Salmonella enterica aisladas de carcasas(n = 10), medio ambiente (n = 14), carne de cabeza (n = 1) y agua de lavado y enfriamientode vísceras (n = 7) en frigoríficos provinciales de Buenos Aires (Argentina) sin análisis de peli-gros y puntos críticos de control (hazard analysis critical control point [HACCP]); la toma demuestras se efectuó antes y después de implementar acciones de mejora. Se llevó a cabo elec-troforesis en gel de campo pulsado (PFGE) utilizando la enzima de restricción XbaI. Las cepaspertenecían a 6 serovares y presentaron 10 patrones de restricción (5 patrones únicos y 5 clus-ters). Demostramos la presencia de diferentes serovares de S. enterica en un mismo frigorífico.

Prevalence of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli from broilers at conventional and kosher abattoirs and retail stores / Prevalencia de Campylobacter jejuni y Campylobacter coli en carcasas de pollo procedentes de frigoríficos, faena tradicional y kosher, y de locales de expendio

Abstract We studied and compared the prevalence of Campylobacter jejuni and Campylobacter coli in chicken carcasses from conventional and kosher broiler abattoirs and retail stores. The prevalence of thermotolerant Campylobacter-positive carcasses was 94.0 (kosher) and 32.0% (conventional) (p< 0.0001), while the prevalence of samples contaminated with C. jejuni, C. coli and simultaneously with both species was 36.0, 2.0 and 56.0% (kosher) and 26.0, 4.0 and 2.0% (conventional) (p< 0.0001), respectively. Samples of chicken carcasses (n = 25) and food contact surfaces (tables, n = 25; knives, n=25) from 25 retails were collected and risk quantification was performed. Retails were categorized as high-risk (n = 11), moderate-risk (n = 11) and low-risk (n = 3). Nineteen (76.0%) carcasses, 20 (80.0%) tables and 18 (72.0%) knives were Campylobacter-positive. Retails and abattoirs proved to be sources of carcass contaminaron with Campylobacter spp. Carcasses from kosher abattoirs were mostly contaminated with Campylobacter spp., whereas C. coli was the most prevalent species isolated from carcasses in retail stores.

Resumen El objetivo del estudio fue determinar y comparar la prevalencia de Campylobacter jejuni y Campylobacter coli en carcasas de pollo obtenidas en frigoríficos por faena convencional y kosher, y en locales de expendio. La prevalencia de Campylobacter spp. termotolerante fue del 94,0 (kosher) y del 32,0% (convencional) (p< 0,0001). La prevalencia de muestras contaminadas con C. jejuni, C. coli y con ambas especies fue del 36,0, del 2,0 y del 56,0% (Kosher) y del 26,0, del 4,0 y del 2,0% (convencional) (p< 0,0001), respectivamente. Se tomaron muestras de carcasas (n = 25) y superficies (tablas, n = 25; cuchilla, n = 25) en 25 locales. Los locales fueron categorizados como de riesgo alto (n = 11), moderado (n = 11) y bajo (n = 3). Diecinueve (76,0%) carcasas, 20 (80,0%) tablas y 18 (72,0%) cuchillas fueron positivas para Campylobacter spp. Frigoríficos y locales fueron fuente de contaminación de carcasas con Campylobacter spp. La prevalencia de Campylobacter spp. fue mayor en carcasas kosher. Campylobacter coli fue la especie más prevalente en carcasas de locales.

Detección y caracterización de Escherichia coli productor de toxina Shiga en ninos atendidos en un hospital pediátrico interzonal de la ciudad de La Plata / Detection and characterization of Shiga toxin-producing Escherichia coli in children treated at an inter-zonal pediatric hospital in the city of La Plata

Escherichia coli productor de toxina Shiga (STEC) es un patógeno transmitido por alimentos que puede causar diarrea acuosa, diarrea sanguinolenta (DS) y síndrome urémico hemolítico (SUH). El objetivo de este estudio fue determinar las características fenotípicas y genotípicas de cepas STEC aisladas de niños con DS y SUH atendidos en un hospital pediátrico de la ciudad de La Plata en el período 2006-2012 y establecer la relación clonal de los aislamientos O157: H7 mediante electroforesis de campo pulsado. El porcentaje de muestras positivas fue de 4,9 y 39,2% en los pacientes que presentaron DS y SUH, respectivamente. Se aislaron 77 cepas STEC de 10 serotipos distintos, con el 100% de recuperación de colonias. El serotipo más frecuente fue O157: H7 (71,4%), seguido por O145: NM (15,6%). El 98,2% de los aislamientos O157: H7 correspondió al biotipo C y fue sensible a los antibióticos ensayados. Todos esos aislamientos presentaron el genotipo stx2, eae, fliC H7, ehxA, iha, efa, toxB, lpfA1-3 y lpfA2-2.Al estudiar la relación clonal de las cepas O157: H7, se identificaron un total de 42 patrones con al menos un 88% de similitud y se establecieron 6 clústeres que agruparon cepas con perfiles idénticos. Los aislamientos eae negativos pertenecieron a los serotipos O59: H19, O102: H6, O174: NM y O174: H21. Las cepas O59: H19 y O174: H21 fueron positivas para el gen aggR. Este estudio muestra que en la ciudad de La Plata y alrededores circulan STEC de diferentes serotipos y genotipos. A pesar de la diversidad genética observada entre los aislamientos O157: H7, algunos fueron indistinguibles por las técnicas de subtipificación utilizadas.

Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) is a foodborne pathogen that can cause watery diarrhea, bloody diarrhea (BD), and hemolytic uremic syndrome (HUS). The objective of this study was to determine the phenotypic and genotypic profiles of STEC strains isolated from children with BD and HUS treated at a pediatric hospital in the city of La Plata in the period 2006-2012, and to establish the clonal relationship of O157: H7 isolates by pulsed field electrophoresis. The percentage of positive samples was 4.9% and 39.2% in patients with BD and HUS, respectively. Seventy-seven STEC strains from 10 different serotypes were isolated, with 100% colony recovery, O157: H7 being the most frequent (71.4%) serotype, followed by O145: NM (15.6%). An average of 98.2% of O157: H7 isolates belonged to biotype C and were sensitive to all the antibiotics tested. All of them (100%) carried genotype stx2, eae, fliC H7, ehxA, iha, efa, toxB, lpfA1-3 and lpfA2-2. When the clonal relationship of the O157: H7 strains was studied, a total of 42 patterns with at least 88% similarity were identified, and 6 clusters with identical profiles were established. The eae-negative isolates belonged to serotypes O59: H19, O102: H6, O174: NM and O174: H21. The strains O59: H19 and O174: H21 were positive for the aggR gene. This study shows that STEC of different serotypes and genotypes circulate in the city of La Plata and surroundings. Despite the genetic diversity observed between the O157: H7 isolates, some were indistinguishable by the subtyping techniques used.

Caracterización genotipica de aislamientos de Escherichia coli obtenidos de cerdos con diarrea posdestete y enfermedad de los edemas / Genotypic characterization of toxigenic Escherichia coli isolated from pigs with postweaning diarrhea (PWD) and edema disease (ED)

El objetivo del trabajo fue caracterizar mediante PCR 47 aislamientos de Escheríchia coli recuperados de 32 cerdos con diagnóstico clínico de diarrea posdestete (DPD) y de 3 cerdos con enfermedad de los edemas (ED). Sobre 44 aislamientos provenientes de cerdos con DPD, 42 (95,5 %) fueron caracterizados como E. coli enterotoxigénicos (ETEC) y 2 (4,5 %) como E. coli productores de toxina Shiga (STEC). Catorce aislamientos de ETEC (33,3 %) fueron positivos para los genes estl/estlI/fedA. El genotipo más complejo fue eltA/estll/east1/faeG/aidA. Los aislamientos provenientes de cerdos con ED se clasificaron como STEC porcinos y fueron portadores de stxJaidA. Once aislamientos (25 %) fueron portadores del gen que codifica la expresión de la adhesina AIDA-I. Sin embargo, en ningún aislamiento se detectaron los genes que codifican la expresión de las adhesinas F5, F6, F41, de intimina y de "Paa". La prevención de la DPD y de la ED podría realizarse mediante el desarrollo de vacunas que generen anticuerpos contra las adhesinas de las cepas de E. coli prevalentes en la Argentina.

The purpose of this work was to characterize 47 Escherichia coli strains isolated from 32 pigs diagnosed with postweaning diarrhea and tree pigs with edema disease by PCR. Forty two (95.5 %) of the strains isolated from diarrheic pigs were characterized as enterotoxigenic E. coli (ETEC) and 2 (4.5 %) as Shiga toxin-producing E. coli (STEC). Fourteen (33.3 %) ETEC strains were positive for est/estll/fedA genes. The most complex genotype was eltA/estl/faeG/aidA. Strains isolated from pigs with ED were classified as porcine STEC and were stxjaidA carriers. Eleven (25 %) strains carried the gene encoding adhesln protein AIDA-I. However, genes coding for F5, F6, F41, intimin and Paa were not detected. The development of vaccines generating antibodies against prevalent E. coli adhesins in Argentina could be useful for the prevention of PWD and ED.

Epidemiologia del síndrome urémco hemolítico en Argentina: diagnóstico del agente etiológico, reservorios y vías de transmissión / The epidemiology of hemolytic uremic syndrome in Argentina. Diagnosis of the etiologic agent, reservoirs and routes of transmission

Shiga toxin-producing Escherichia coli (STEC) cause sporadic cases and outbreaks of nonbloody and bloody diarrhea, and hemolytic uremic syndrome (HUS). E. coil O157:H7 is the most prevalent STEC serotype. However, other serotypes (O26:H11; O103:H2; O111:NM; O121:H19; O145:NM, among others) can cause a similar disease spectrum. Shiga toxins (Stx1, Stx2, and their variants), intimin, and enterohemolysin are the main virulence factors. Three different diagnostic criteria are used to determine the frequency of STEC infection: 1) isolation and characterization of STEC strains; 2) detection of specifically neutralizable free fecal Stx; and 3) Serological tests to detect Stx-antibodies. The surveillance of the STEC strains is performed using subtyping techniques: a) genotyping of Stx and eae by PCR-RFLP; b) phage typing of E. coil O157 strains; and c) pulsed-field gel electrophoresis. STEC O157 and non-O157 strains are recovered from clinic, animal, food and environmental samples, and E. coli O157:H7, a Stx2 and Stx2c producer, harboring eae and ehxA genes, is the most common serotype. During a prospective case-control study conducted to evaluate risk factors for sporadic STEC infection in Mendoza Province and Buenos Aires City and its surroundings during 2001-2002, exposures associated with risk included eating undercooked beef, contact with a child < 5 years with diarrhea and living in or visiting a place with farm animals. Both washing hands after handling raw beef, and eating fruits and vegetables were frequently protective. Strategies of prevention and control are necessary to decrease the incidence of STEC infections in Argentina.